Determination of the neutralizing potency of horse antivenom against bothropic and crotalic venoms by indirect enzyme immunoassay

The use of ELISA to determine antisnake venom potency of horse immune sera should provide benefits of cost and reproducibility compared to in vivo assays. In the present investigation we evaluated the correlation between ELISA antibody levels and in vivo neutralization assays. For the indirect ELISA method, 0.016 µg/well of Bothrops jararaca or Crotalus durissus terrificus venom were used to coat the plates and 100 µl/well of each sample of antibothropic or anticrotalic venom sera were used at 1:10,000 dilution. Sheep anti-horse IgG conjugated to peroxidase was added and the substrate H202/o-phenylenediamine produced the color that was read at 492 nm. A correlation coefficient of r=0.97 was found for anticrotalic venom antibodies and no significant correlation was observed for antibothropic venom sera using 16 serum samples from immunized horses. However, when three antibothropic venom sera showing high in vivo neutralization...

Neutralización de las actividades tóxicas y enzimáticas de cuatro venenos de serpientes de Guatemala y Honduras por el antiveneno polivalente producido en Costa Rica / Neutralization of toxic and enzyme activities of 4 venoms from snakes of Guatemala and Honduras by the polyvalent antivenin produced in Costa Rica

Se estudió la capacidad del antiveneno polivalente producido en Costa Rica para neutralizar las actividades letal, hemorrágica, edematizante, proteolítica, hemolítica, hialuronidasa y fibrinolítica de los venenos de Bothrops asper y Bothrops nummifer de Honduras y de Agkistrodon bilineatus y de Crotalus durissus durissus de Guatemala. La capacidad neutralizante del suero se expresó como DE50 (Dosis efectiva 50%), definida como la razón antiveneno/veneno en la que la actividad del veneno es reducida en un 50%. El antiveneno fue altamente eficaz en la neutralización de las actividades letal, hemorrágica, hemolítica, hialuronidasa y caseinolítica de los venenos de B. asper, B. no de B. nummifer, el efecto fibrinolítico fue neutralizado sólo parcialomente, en tanto que estudiaron los venenos de B. asper y C. d. durissus. El antiveneno neutralizó adecuadamente el veneno de A. bilineatus con excepción del efecto hemolítico, cuya neutralización fue sólo parcial. Sin embargo, en términos cuantitativos, se requirió un volumen mayor de antiveneno para neutralizar algunas actividades del veneno de A. bilinneatus. En relación al efecto edematizante, el antiveneno neutralizó eficazmente los venenos de B. asper y A. bilineatus, en tanto que el veneno de B. nummifer fue neutralizado sólo parcialmente, y el de C. d. durissu no fue neutralizado del todo. Experimentos inmunoquímicos mostraron una gran similitud entre los venenos de B. asper, B. nummifer y C. d. durissus colectados en Honduras y Guatemala cuando se compararon con los de las mismas especies colectadas en Costa Rica. No bostante, hay divergencias inmunoquímicas entre venenos de diferentes especies. Se concluye que, con la excepción del efecto edematizante inducido por los venenos de B. nummifer y C. d. durissus, el antiveneno polivalente producido en costa Rica es efectivo en la neutralización de los venenos de estas cuatro especies de serpientes